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Instruções para o exame: TRANSCRIPTOMA

Exigência	Descrição
Materiais	RNA Extraído
Conservantes	Paxgene (tiocianato de guanidina)
Volume Recomendável	2 a 4 ml
Tempo de Jejum	Jejum não obrigatório
Conservação	Até 2 dias entre 18 a 25°C
Critérios de restrição	Ausência de termo de consentimento
Critérios de Rejeição	Conservante inadequado Amostra em temperatura inadequada Amostra sem a correta identificação Amostra fora do prazo de viabilidade
Orientações para envio de amostras	Coletar 4 ml de sangue periférico em tubo específico PAXgene. Enviar a amostra em tubo primário a temperatura ambiente, dentro do prazo máximo de 48h.
Documentos Obrigatórios	Termo de Consentimento

Metodologia

A metodologia usada no exame é NGS RNA.

Para sequenciamento dos transcriptomas, o RNA total extraído é depletado de sequências abundantes, como RNA ribossomal e de globina, de acordo com as instruções do fabricante (Illumina Ribo-Zero Plus rRNA Depletion Kit). As bibliotecas são preparadas com o kit (Truseq Stranded Total RNA), e sequenciadas utilizando NovaSeq 6000 S4 Reagent Kit (300 ciclos), com bibliotecas do tipo paired-end (150+150).