Esse teste avalia mutações ativadoras nos exons 2, 3 e 4 do gene KRAS, para determinar elegibilidade para terapias anti-EGFR em tumores colorretais metastáticos. A detecção de mutações ativadoras em KRAS indica uma probabilidade baixa de resposta à esses agentes terapêuticos.
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Genes Analisados
- KRAS: Exons 2 (códons 12, 13 e 33), 3 (códons 59 e 61) e 4 (códons 117 e 146)
Documentos Obrigatórios
Instruções
| Exigência | Descrição |
|---|---|
| Materiais |
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| Conservantes |
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| Conservação |
Os blocos de parafina devem ser enviados em temperatura ambiente (18-25ºC). Durante o envio, os blocos devem ser acondicionados em embalagens fechadas, que permitam proteger o material de deformações mecânicas e calor. |
| Critérios de Rejeição |
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| Documentos Obrigatórios |
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| Última Atualização |
28/01/2022 |
| Documentos Obrigatórios |
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Metodologia
O DNA é extraído do bloco de parafina após análise de uma patologista e delimitação da área demarcada através do kit QIAamp DNA FFPE Tissue Kit. A técnica principal para o preparo da biblioteca de DNA é utilizando-se a tecnologia de PCR multiplexado com molecular barcode (QiaSeqDNA V3). Caso existam regiões não adequadamente cobertas na primeira técnica, é preparada por PCR convencional seguido de Nextera ou Sanger. O resultado final é uma cobertura de 100% das bases com profundidade acima de 300x nas regiões de interesse. A chamada de variante é feita através do transcrito de referência a partir da base A do códon de iniciação ATG alinhado contra o genoma de referência GRCh37/hg19.
Limitações do exame
- Este teste detecta pequenas deleções e duplicações até 17 bp, mas grandes deleções e duplicações não são detectadas por esta metodologia. Outras alterações estruturais,como inversões e translocações também não são detectadas. Havendo suspeita de algumas destas alterações, pode-se usar metodologias como array CGH, MLPA, qPCR ou FISH. - Mutações por expansão de repeats de trinucleotídeos não são detectáveis por sequenciamento. - Mutações intrônicas profundas, mitocondriais ou em regiões regulatórias, como promotores, não são detectáveis no presente teste. - Alteração epigenéticas não são detectáveis por este teste.
Doenças relacionadas
| Código | Descrição | Detalhes |
|---|---|---|
| COLORRETAL | CÂNCER COLORRETAL - CCR |
Outros nomes para ANÁLISE SOMÁTICA DO GENE KRAS
- Câncer Colorretal - CCR
- Câncer de Intestino
- Exons 2, 3 e 4 do Gene KRAS
- Gene KRAS